被测样品首先应该具有足够的纯度，否则会造成严重干扰，影响图谱解析。红外光谱法可以用于气体、液体和固体样品的测定。
　　1．气体样品
　　气体或低沸点的液态样品必须在已抽成真空的气体池中测量。样品池的窗口由抛光的NaCl或KBr晶片制成。常用样品池长度为5cm和10cm两种，容积为50～150ml左右。主要用于气体物质分析。
　　2．液体样品
　　①纯液体样品：测定时可采用可拆卸液体样品池。液体样品池的光程长度为0.01～1mm。红外图谱上常注明液膜法就是采用液体池测定，液体池的窗口多用NaCl晶片。液膜法的优点是简便，没有溶剂干扰。　
　　②样品溶液：测定时采用可拆卸液体样品池。问题是目前还没有一种溶剂在4000～600cm不产生强吸收，稀溶液的红外光谱常用CS和CCl作溶剂，若被测化合物的吸收带在低频区（1300～625cm），可选用CS作溶剂；若被测化合物的吸收带在高频区（4000～1300cm），可选用CCl作溶剂。
　　3．固体样品
　　固体样品的测定常用方法有以下三种：（1）研糊法。将2～5mg样品置玛瑙研钵中，研磨成直径小于2um的小颗粒，加两滴液体石蜡后再研磨，使成为均匀的糊状物。将研糊放在两NaCl晶片之间，放入光路测定。（2）溴化钾压片法。将1mg样品置玛瑙研钵中，加大约100mg干燥溴化钾研磨成均匀粉末。然后把混合物转入专用的压片机冲模中，一面抽气一面加压，制成几乎透明的薄圆片。将其放入光路中进行测定。（3）液膜法。将样品溶解于挥发性溶剂中，将溶液滴加在KBr晶片上，除去溶剂后进行测定。制样方法不同，得到的图谱差别很大。