一、选择题 1．HPLC与GC比较，可忽略纵向扩散项，主要原因是： A.柱前压力高 B.流速比GC的快 C.流动相粘度大 D.柱温低
2．在反相色谱法中，若以甲醇─水为流动相，增加甲醇的比例时，组分的容量因子k与保留时间t，将有什么变化： A.k与t增大 B.k与t减小 C.k与t不变 D.k增大，t减小
3．用ODS柱，分析一有机弱酸混合物样品。以某一比例甲醇─水为流动相时，样品容量因子较小，若想使容量因子适当增加，较好的办法是： A.增加流动相中甲醇的比例 B.增加流动相中水的比例 C.流动相中加入少量HAc D.流动相中加入少量的氨水
4．高效液相色谱与经典液相色谱的主要区别在于： A.高温 B.高效 C.柱短 D.上样量 E.流动相
5．在高效液相色谱中，范氏方程中的哪一项对柱效的影响可以忽略不计： A.涡流扩散项 B.流动相的传质阻力项 C.固定相的传质阻力项 D.分子扩散项 E.A+B
6．下列哪个因素对理论塔板高度没有影响： A.填料的粒度 B.流速 C.填料粒度的均匀程度 D.色谱柱的柱长 E.组分在流动相中的扩散情况
7．有效理论塔板数与理论塔板数之间的区别是： A.扣除死体积 B.增加柱长 C.改变流动相性质 D.提高分离度 E.无区别
8．硅烷化键合固定相，主要用于分离： A.极性化合物 B.非极性化合物 C.离子型化合物 D.分子量相差很远的化合物 E.蛋白质类化合物
9．在高效液相色谱中，梯度洗脱适用于分离： A.几何异构体 B.极性化合物 C.分子量相差大的混合物 D.分配比变化范围宽的复杂试样 E.挥发性组分
10．克服柱后展宽主要减少： A.接管和检测器流动池容积及时间常数 B.进样量 C.柱长 D.进样器的死体积 E.柱温 11．在高效液相色谱中，与含量成正比的是: A.保留时间 B.峰高 C.相对保留值 D.理论塔板数 E.基线宽度
12．高效液相色谱与气相色谱仪比较，增加了： A.恒温器 B.高压泵 C.程序升温 D.检测器 E.自动进样器
13．在高效液相色谱中，适用于梯度洗脱装置的检测器是： A.紫外检测器 B.示差折光检测器 C.电导检测器 D.热导率检测器 E.荧光检测器
14．在高效液相色谱中，二个溶质的分离度与下列哪些因素无关： A.增加柱长 B.改用更灵敏的检测器 C.更换固定相 D.更换流动相 E.改变流速
15．样品中各组分的出柱顺序与流动相的性质无关的色谱是： A.离子交换色谱 B.环糊精色谱 C.亲合色谱 D.凝胶色谱
16．键合相的键合基团的碳链长度增长后： A.极性减小 B.极性增大 C.载样量增大 D.载样量减小
17．在分配色谱法与化学键合相色谱法中，选择不同类别的溶剂（分子间作用力不同），以改善分离度，主要是： A.提高分配系数比（α） B.容量因子增大 C.保留时间增长 D.色谱柱柱效提高 二、解析题 1. 在2m长的某色谱柱上，分析苯（1）与甲苯（2）的混合物。测得死时间为0.20min，甲苯的保留时间为2.10min及半峰宽为0.285cm，记录纸速为2cm/min。只知苯比甲苯先流出色谱柱，且苯与甲苯的分离度为1.0。求： ①甲苯与苯的分配系数比（α）； ②苯的容量因子与保留时间； ③达到R=1.5时，柱长需几米？ （α=1.1，k=8.3，t=1.86min，柱长4.5m） 2. 在一根甲基硅橡胶（OV-1）色谱柱上，柱温120℃测得一些纯物质的保留时间：甲烷4.9、正己烷84.9、正庚烷145.0、正辛烷250.3、正壬烷436.9、苯128.3、3-正己酮230.5、正丁酸乙酯248.9、正己醇413.2秒及某正构饱和烷烃50.6秒。 （1）求出这些化合物的保留指数。说明应如何正确选择正构烷烃物质对，以减小计算误差。 （2）解释上述五个六碳化合物的保留指数为何不同。 （3）未知正构饱和烷烃是何物质？ （苯678、3-正己酮785、正丁酸乙酯799，正己醇890，未知物是正戊烷） 3. 有一含有四种组分的样品，用气相色谱法FID检测器测定含量，实验步骤如下： （1）测定校正因子：准确配制苯（基准物、内标物）与组分A、B、C及D的纯品混合溶液，它们的重量分别为0.435、0.653、0.864及1.760g。吸取混合溶液0.2μl，进样三次。测得平均峰面积分别为4.00、6.50、7.60、8.10及15.0面积单位。 （2）测定样品：在相同的实验条件下，取样品0.5μl，进样三次。测得A、B、C及D的峰面积分别为3.50、4.50、4.00及2.00面积单位。已知它们的分子量分别为32.0、60.0、74.0、及88.0。 （3）求算：各种组分的相对重量校正因子，相对摩尔校正因子，各组分的重量百分数，各组分的摩尔百分数。 （相对重量校正因子：f=0.924、f=1.04、f=0.981、f=1.08。相对摩尔校正因子：f=2.25、f=1.35、f=1.03、f=0.96。重量百分数：A%=23.1%、B%=33.4%、C%=28.0%、D%=15.4%。摩尔百分数：A%=39.4%、B%=30.4%、C%=20.6%、D%=9.6%）
三、思考题 1．用Van Deemter 方程式说明，应如何选择HPLC的实验条件，以增加柱效？ 2．何谓化学键合相，有哪些类型？分别用于哪些液相色谱法中？化学键合相色谱法与液─液分配色谱法有何关系与不同。 3．试讨论影响分离度的各种因素。它们对R 的影响有何差别？为什么说流动相的种类主要影响α，流动相的配比主要影响k。 4．试述各种定量方法及其优缺点。什么情况才可用内标或外标一点法？ 5. 试说明，《中国药典》附录中的“色谱条件与系统适用性试验”项，包含哪些内容？ 6. 高效液相色谱仪由哪些部件组成？与气相色谱仪比较有何异同？ 7. 正相色谱中常用的固定相和流动相有哪些？适合分离哪类化合物？ 8. 正相色谱中如何判断各组分的出柱顺序？与流动相极性大小的关系？ 9. 反相色谱中常用的固定相和流动相有哪些？适合分离哪类化合物？ 10. 在反相色谱中，若增大甲醇在流动相中的比例，样品的K 和t值将如何改变？ 11. ODS是什么？如何制成的？有何特点？ 12. 何为梯度淋洗？优缺点各是什么？ 13. HPLC中常用的检测器有哪些？它们各自的特点和适用范围是什么？ 14. HPLC中的Van Deemter方程与GC的有何区别？提高柱效的措施有哪些？